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ACE C18-AR色谱柱介绍Ⅰ- 具有独特选择性的C18色谱柱
点击次数:103 发布时间:2019-04-15

探索ACE C18-AR的优势

  • 为“标准”C18色谱柱提供了替代选择性,额外推荐用于具有芳香族官能团的化合物
  • 超惰性、超高纯度硅胶,具有卓越的峰形和可重现性
  • 与高水含量的流动相兼容,以保留和分离极性化合物
  • 为高温应用提供极佳的键合相稳定性
  • 超低流失相可以确保UV和LC/MS的兼容性
  • 可获得高通量色谱柱尺寸

为什么需要另一种新的C18相?
使用超纯、超惰性硅胶具有许多公认的优点,包括改善可重现性、寿命和色谱性能(特别是碱性分子)。

然而,由于超惰性硅胶表面不再有效促进分离,所以用高纯度硅胶制造的C18柱可以显示出接近相同的选择性。

因此,通过改用替代制造商的同等产品,一个带头品牌的问题分离很可能不会得到显著改善。
多年来,经验丰富的色谱学家们一直在寻求由这样带头的C18色谱柱品牌展示的、具有可靠性能和可重现性优点的相,但另外也为他们的挑战性应用提供了所需的替代选择性。

 

ACE C18-AR有何不同?

C18键合相目前主导着HPLC市场,最近的调查显示,它们仍然占据了所有HPLC色谱柱销售量的50-60%。

然而,近年来,由于它们提供的替代选择性,苯基键合相的使用显著增长。

据估计,苯基相目前占HPLC色谱柱销售量的10-15%,其它成为C18相之后的最大子类别。

ACE C18-AR色谱柱采用了特殊开发的配体,将C18链与完整苯基官能团结合在一起,从而将C18和苯基特征的优点结合到单个相中。

基于与ACE C18相同的超惰性、超纯、超可重现性的硅胶平台,读特的ACE C18-AR色谱柱为C18柱提供了替代选择性。

 

ACE C18-AR显示出对C18键合色谱柱的替代选择性

化合物:1)4-乙酰氨基苯酚2)4-氨基苯甲酸3)4-羟基苯甲酸4)咖啡茵

色谱柱:150 x 4.6mm, 3μm

流速:1.00ml/min

温度:40°C

检测:UV, 240nm
流动相:

A. 0.1% v/v甲酸(溶于水中)

B. 0.1% v/v甲酸(溶于乙腈中)

梯度:

时间(分钟) %B
    0                  5
    9                 35

 

“我们需要一个C18相来提供不同的色谱分析和改善的分离度- 所提供的ACE C18-AR” 某制药公司的高级分析师

 

何时应用ACE C18-AR?
由于其相似的疏水特性,ACE C18-AR色谱柱可用于通常会考虑“标准”C18色谱柱的应用中。

然而,由于其完整的苯基官能团,ACE C18-AR还被推荐用于涉及含有芳香族官能团的化合物的分离。
本手册中包含的应用证实,ACE C18-AR可用于改善C18色谱柱上存在问题的分离。

独特的ACE C18-AR相为C18色谱柱提供了替代选择性,但对规定为C18键合色谱柱的方法,保留了有效的选择。

在许多情况下,证实不适合C18色谱柱的相同评估条件被证实适用于C18-AR色谱柱,这就避免了冗长的方法再开发。

 

应用#1 - 水溶性维生素

样品:1)吡哆醇2)对氨基苯甲酸3)泛酸4)叶酸5)氰钴胺素6)d-生物素7)核黄素

色谱柱尺寸:150 x 4.6mm

流速:1.50ml/min
流动相:A) 20mM KH2PO4 (pH 2.8) B) 20mM KH2PO4 (pH 2.8)(溶于50:50 v/v甲醇/水中)

线性梯度:在15分钟内20%-70% B

温度:40°C

检测:UV, 205nm

 

含有水溶性维生素的该测试阐明,带头的C18色谱柱品牌可以提供类似的选择性。

优化温度和梯度后,在ACE C18上实现了可接受的分离,关键对2,3仅基线分离。

为了提高方法的耐用性,蕞好尝试并进一步改善分离度。由于评估条件已经蕞佳,我们现在研究改用另一种C18色谱柱品牌是否可以改善我们的关键对(峰2、3和5、6)的分离。

这种方法代表了目前在许多实验室中开展的方法开发策略。
如上述结果所示,Zorbax XDB C18和Sunfire C18色谱柱不再分离关键对2、3,而Luna C18(2)色谱柱显示关键对2、3的分离度略有改善,但当前关键对5、6 仅得到了部分分离。
然而,独特的ACE C18-AR相可以提供与带头的C18色谱柱品牌完全不同的分离度。

两个关键对的分离度得到显著改善,方法的耐用性也不再是问题。

实际上,现在可以进一步优化色谱柱尺寸和评估条件(以减少分析时间)。

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